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        細胞培養過程中添加劑起什么作用?

        能量來源:谷氨酰胺
        L-谷氨酰胺是一種氨基酸,細胞的重要能量來源、參與蛋白質的合成和核酸代謝。同時L-谷氨酰胺不穩定,在中性的水溶液中會自發降解; 降解產物對細胞有毒性 (對干細胞,原代細胞影響尤其大)。能影響細胞活性、蛋白表達水平及糖基化模式等。那如何解決呢?

        方案有二:

         選擇不含谷氨酰胺的培養基,自己添加

        選擇穩定的谷氨酰胺替代物

        經過科學家不斷努力,終于找到了穩定的谷氨酰胺替代物: glutaGRO。它有何方功能呢?原來,它是由L-丙氨酸和L-谷氨酰胺縮合形成的二肽,穩定性高,可在室溫下保存,2年穩定 (谷氨酰胺需冷凍保存),使用更方便。同時不易降解,不產生有毒性氨,更利于細胞生長。但仍需注意:該替代物適于哺乳動物細胞培養,但不適合昆蟲細胞培養體系?。?!

        能量來源 : 丙酮酸 (Sodium Pyruvate)
        丙酮酸鈉可以作為細胞培養中的替代碳源。當葡萄糖不足的時候,細胞可以代謝丙酮酸鈉,保證細胞更好地生長。同時某些對葡萄糖利用存在問題的細胞必需添加哦。

        平衡鹽溶液

        平衡鹽溶液主要是由無機鹽、葡萄糖組成;它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養;同時用于取材時組織塊的漂洗、細胞的漂洗、配制其他試劑等。

        它由這些小伙伴組成:PBS 磷酸鹽緩沖液,DPBS(Dulbecco’s Phosphate-Buffered Salines), Earle’s 平衡鹽, Hank’s 平衡鹽。

        培養基中的pH緩沖劑

        絕大多數細胞的最佳生長條件是pH 6.8-7.8。

        多數培養基利用碳酸氫鈉進行緩沖,碳酸氫鈉的緩沖需要二氧化碳。其中高碳酸氫鈉 (1.5 – 3.7g/L) 需要 5 – 10% CO2,低碳酸氫鈉(0.35g/L) 不需要二氧化碳孵箱。當然,也有不依賴于二氧化碳的氫離子緩沖劑如:HEPES,在一定范圍內對細胞無毒性作用。能較長時間控制恒定的pH范圍,保證細胞的良好生長。大家可以根據細胞和實驗要求具體選擇。


        公司簡介 / Company profile
        上海傳秋生物科技有限公司
        Shanghai Chuan Qiu Biotechnology Co.,Ltd.
               公司主要依托復旦大學、同濟大學等上海地區多家著名高校,擁有一支富有經驗的開發團隊,專業從事細胞及細胞...
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