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        血清出現沉淀如何處理?

        血清沉淀是什么?

        血清中經常會出現肉眼可見的沉淀,其成分有多種類型,產生的原因有很多,主要有纖維蛋白、磷酸鈣還有一些其它成分。

        1. 纖維蛋白(Fibrin)

        血清中肉眼可見的沉淀物大多屬于這一類型。由于在生產過程中,血清采集、過濾(3 次 0.1 μm過濾)和灌裝處理都是在低溫條件下快速完成, 此時血清中纖維蛋白原(Fibrinogen)處于溶解狀態。但在解凍之后, 血清中纖維蛋白原往往會發生凝集,形成肉眼可見的沉淀。

        2. 磷酸鈣(Calcium Phosphate)

        這是一種常見的沉淀成分,通常會造成血清出現云霧狀渾濁。當產品在 37℃保存時,這種現象尤其明顯,在倒置顯微鏡下可觀察到小黑點的存在。這些小黑點在布朗運動的作用下四處游動,常被誤認為是微生物污染。

        3. 其他成分(Other) 

        血清中的其他成分也會形成沉淀,例如膽固醇形成的油脂滴和其他蛋白沉淀等。

        血清沉淀會影響細胞培養嗎?


        1. 細胞生長

        我們在出廠前都會對血清進行一系列質檢測試,確保血清質量達到嚴格標準。血清測試和細胞培養經驗也表明,其沉淀成分不會影響血清作為細胞培養添加物的表現。這一點得到了眾多客戶和其他血清供應商的肯定。解凍之后, 血清中纖維蛋白原往往會發生凝集,形成肉眼可見的沉淀。


        2. 懷疑污染

        磷酸鈣顆粒經常會被當成微生物污染而引發不必要的擔憂。一般情況下,當操作人員融化血清后注意到有霧狀渾濁時,常將其存放在 4℃冰箱中觀察,并考慮接下來是否繼續使用。但這樣會使沉淀進一步增多,反而會使血清更加渾濁,進而誤以為存在血清污染。并且,在倒置顯微鏡下,可在血清中觀察到四處游動的小黑點(磷酸鈣顆粒的布朗運動),更容易使人誤以為存在微生物污染。


        為防止這類誤解的產生,我們不建議客戶培養血清來驗證是否存在污染,而是將血清直接接種在細菌培養基上進行培養,以觀察是否有細菌的增殖。并且,進行革蘭氏染色,并在油鏡(100 X 10 倍)下觀察可直接確認是否存在微生物污染。

        怎樣操作可以盡量避免沉淀出現?

        1. 正確解凍

        首先,應按照逐步解凍的方式正確解凍血清:從-20℃取出后,置于 4℃冰箱緩慢解凍,最后置于室溫完成解凍。如果直接從-20℃拿到室溫或 37 ℃水浴解凍,則非常容易產生沉淀。在解凍過程中,請注意時不時緩慢搖晃瓶子,減少沉淀的產生。為避免反復凍融,建議您將血清分裝使用。


        2. 使用和保存注意事項

        血清沉淀很難預測和避免,出現沉淀后也無需擔憂,這并不會影響血清的品質。已知血清沉淀在以下條件下會有增多的可能:

        1) 熱滅活;

        2) 37℃培養;

        3) 反復凍融;

        4) 伽馬射線照射; 

        5) 2-8℃長期保存; 

        6) 長期保存于可自動化霜的冰箱中(溫度不穩定)。

        總 結:

        血清產品中出現沉淀屬于常見現象,但不會影響血清的品質,對細胞培養而言也是沒有任何問題的,大家可以放心使用!


        公司簡介 / Company profile
        上海傳秋生物科技有限公司
        Shanghai Chuan Qiu Biotechnology Co.,Ltd.
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